12位固相萃取裝置是一種樣品前處理技術，它是由液固萃取柱和液相色譜技術相結合發展而來的。主要用于樣品的分離、純化和濃縮。與傳統的液-液萃取方法相比，可以提高分析物的回收率，更有效地將分析物與干擾成分分離，減少樣品預處理過程，省時省力。
那么如何操作12位固相萃取裝置呢？
1、選擇SPE小柱或濾膜
首先，根據待測樣品的性質，選擇保留能力強的固定相。如果待測樣品帶負電，可以使用陰離子交換填料，否則，可以使用陽離子交換填料。如果是中性分析物，可以用反相填料進行萃取。SPE小柱或過濾器的尺寸和規格應取決于樣品中分析物的濃度。對于低濃度的體內樣品，一般使用盡可能少的固定相填料來提取更大體積的樣品。
2、激活
萃取前，用裝滿小柱的溶劑沖洗小柱或用5-10ml溶劑沖洗濾膜，以保持SPE填料濕潤，因為填料的干燥會降低樣品保留值，以及每個小柱的干燥程度也會影響恢復。率再現性。先用甲醇等水溶性有機溶劑沖洗填料，因為甲醇可以潤濕吸附劑表面并滲透到非極性硅膠鍵合相中，使硅膠更容易被水潤濕；然后加入水或緩沖液沖洗，創造與樣品溶劑兼容的環境并提高回收率。
3、上樣
一般可以采用四種方法：
(1)用0.1mol/L酸或堿調節pH<3或pH>9，離心提取上層；
(2)用甲醇、乙腈等沉淀蛋白質，取上清，用水或緩沖液稀釋，然后提?。?/div>
(3)用酸或無機鹽沉淀蛋白質，取上清液，調整pH值，然后提取；
(4)超聲15分鐘后，加水和緩沖液，提取上清液。流速應控制在1ml/min，過快的流速不利于分析物與固定相的結合。
4、沖洗
反相SPE的清洗溶劑多為水或緩沖液，清洗液中可加入少量有機溶劑、無機鹽或pH值。小柱中加入的清洗液不應超過一根小柱的體積，SPE濾膜為5-10ml。
5、洗脫
應選擇5-10ml離子強度較弱但能洗掉分析物的洗脫溶劑。如果需要更高的靈敏度，可以將洗脫液蒸干，然后在進樣前用流動相將殘留物復溶。體內樣品洗脫后含水，可冷凍干燥。保留能力弱的SPE填料可以用小體積、弱洗脫液清洗分析物，然后用C18柱等極性強的HPLC分析柱對洗脫液進行分析。如果分析物可以被離子化，則調節pH值以抑制樣品的離子化以增強分析物在反相SPE填料中的保留，在洗脫過程中調節pH值使其離子化并用較弱的溶劑洗脫，收集然后調整洗脫液的pH值，以在HPLC分析中實現更好的分離。在洗脫過程中，應降低流速，使用兩次小體積洗脫代替一次大體積洗脫，以提高回收率。
更新時間：2022-07-26 
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